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ELISA检测样品的处理方法
浏览次数:76发布日期:2021-10-14

通常大家可用于ELISA检测的样本是有多种类型的,如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等,不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第一步,下面简单先容一下不同类型的样本的处理方法:

1、血清:血清是常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。

采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA检测中会有非特异性的显色,而导致检测的不准确性。同时也应避免细菌污染,因为菌体内可能含有内源性的HRP从而导致检测的假阳性。

2、血浆:用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液标本。

标本采集后30min内4℃ 1000×g离心15min,取上清即血浆。将上清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。

3、细胞培养上清:取细胞培养上清到离心管。

1000×g离心20min,除去细胞碎片及杂质,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。

4、细胞裂解液

5、组织匀浆液

6、尿液、唾液等其他液体生物样本

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ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有三个必要的试剂:(1)固相的抗菌素原或抗体,即"免疫吸附剂"(immunosorbent);(2)酶标记的抗原或抗体,称为"结合物"(conjugate);(3)酶反应的底物。根据试剂的来源和标本的情况以及检测的具体条件,可设计出各种不同类型的检测方法。


双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,操作步骤如下:

1、将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。

2、加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。

3、加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。

4、加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。


以上就是关于ELISA检测样品的处理方法,如果你还有什么不清楚的地方可以给大家留言或者联系在线客服咨询!

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